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Tipo de Documento: Artigo
Título: Detection of different Brazilian strains of the bovine herpesvirus-1 (BHV-1) by polymerase chain reaction
Título(s) alternativo(s): Detecção de amostras brasileiras do herpesvirus bovino 1 (BHV-1) pela reação em cadeia pela polimerase
Autor(es): Cândido, Alexandre Luna
Martins, Almir de Sousa
Barros, Patrícia Pimental de
Resende, Maurício
Data do documento: Jun-1999
Abstract: A técnica da reação em cadeia pela DNA polimerase (PCR) foi usada para a amplificação rápida de um fragmento de 456bp da região única curta (Us) do genoma do BHV-1. Iniciadores de 18pb do gene da ORF1 foram usados para a amplificação das amostras-padrão e brasileiras. Uma amplificação clássica não foi bem sucedida. A amplificação foi obtida quando se escolheu uma região com baixa concentração de GC no DNA do BHV-1 e através da desnaturação térmica (95° C para 5min) seguida de ciclos térmicos (94° C por 1min e 30seg; 52° C por 1min; 72° C por 1min e 30seg; e ainda por 35 ciclos de 94° C por 1min; 52° C por 1min; 72° C por 1min e 30seg; usando um tempo de extensão final de 72° C por 5min). A clivagem com Pst I confirmou a especificidade do fragmento da ORF 1 do BHV-1. A amplificação do fragmento em todas as amostras testadas sugere que a região é fortemente conservada no genoma do BHV-1. Este PCR poderá detectar rapidamente amostras clínicas, sendo sensível e específico para diagnosticar infecções pelo BHV-1.
Palavras-chave: Herpesvirus bovino
Reação em cadeia da polimerase
DNA
ISSN: 0102-0935
Instituição/Editora: Escola de Veterinária UFMG
Citação: CANDIDO, A. L. et al. Detection of different Brazilian strains of the bovine herpesvirus-1 (BHV-1) by polymerase chain reaction. Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia, Belo Horizonte, v. 51, n. 3, jun. 1999. Disponível em: <http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09351999000300007&lng=en&nrm=iso>. Acesso em: 3 fev. 2014.
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